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細胞復蘇

 一、儀器與試劑
護目鏡、厚毛線手套等
二、操作流程
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃;
2) 準備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的完全培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預熱;
3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中復溫晃動凍存管以提高復溫速率;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,混勻后,1000rpm 離心 5min;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,寫上細胞名稱、日期,再加入 4ml 完全培養(yǎng)基;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 完全培養(yǎng)基重懸細胞后,轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉入
注意:從液氮中取出細胞凍存管時,若凍存管內有液氮進入,需擰松凍存管,排出內部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,置于干冰上,然后放入 37℃水浴中,避免溫差太大造成液氮快速氣化而爆炸

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